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大家好,第一次發文,若有排版問題或不妥之處請多包涵指教。 小弟我最近的實驗中,會希望從brain (整個小鼠brain,軟組織) 中萃取steroid。考慮到 同個sample中需要同時看數個setroid,並且做更精確的定量,因此想以HPLC/MS分析。 由於小弟非HPLC相關背景,因此對這部分細節其實並不熟悉,且steroid非ptotein,無法 以western進行分析,因而不知該從何下手。 目前卡在重要的萃取以及前處理,已經問到以在extract時加入內標做為extraction loss 的control,且sample可能需要藉由離子交換或管柱純化的方式進行處理,可能得將磷脂 質以及組織中膽固醇清除乾淨。 但細節部分,例如extraction buffer,方法或是要用那種column等都沒有頭緒。 因此想請教是否有相關的經驗可以提供。或者是否知道有廠商可以提供service或討論的 情報。 感謝。 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 49.215.137.115 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1541380109.A.9A6.html
july81212: 用EA extraction然後不要前處理會影響定量 除非你內標 11/05 09:26
july81212: 本身就是steroid 不過low polar還是建議用GC比較好 11/05 09:26
maurice9325: 請問您說的EA extraction ,全名是什麼,謝謝。 11/05 10:25
july81212: ethyl acetate 11/05 19:11
maurice9325: 好的,我在搜尋文獻,謝謝。 11/07 08:14