[求救] SW-1353誘導NO

[crystalwu (婧啵)]

請問板上有沒有神人用SW-1353 cell line以IL-1beta誘導測一氧化氮產量成功的？
目前參照了幾篇文獻，細胞數從1000～20000 cells/well 和 IL-1beta 濃度 30～10 ng/
mL都組合試過了，都沒辦法
和控制組產生差異
使用的Griess reagent是自行配置的（測試過試劑沒問題），不知道這種自配的sensitiv
ity 會不會較kit差，所以測不出來？
求有相關經驗的大大分享 感激不盡

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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 49.158.64.31 (臺灣)
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※ 編輯: crystalwu (49.158.64.31 臺灣), 08/03/2023 16:21:03
推 tharaohfu: 同樣的步驟Positive control 做得出來嗎？比如說raw+L
→ tharaohfu: PS
→ crystalwu: RAW做的出來，目前在懷疑是否該細胞是否需要特別飢餓處
→ crystalwu: 理（先前同方法處理RAW時無特別飢餓也能成功誘導）
→ crystalwu: 目前也有用SW1353試著以LPS（有部分文獻這樣使用）誘
→ crystalwu: 導 一樣未成功
推 pichia: 這是軟骨肉瘤細胞耶~~你們的研究是不是設計錯了???
推 tharaohfu: 我沒碰過SW1353，至少要有TLRs之類的基因表現加LPS才
→ tharaohfu: 會有反應。另一條路是加東西誘導後直接用qPCR P看看有
→ tharaohfu: 沒有iNOS表現，如果跟control組差異不大就應該真的不
→ tharaohfu: 會有NO產生了，因為已經用兩種方法去驗證了。