→ ampicillin: 小弟才疏學淺，想知道為何C、D抗體就不算成功？ 10/27 15:14
→ maurice9325: 預期心理吧，當然DNA層次確實不見得會100%反應於蛋10/27 16:03
→ maurice9325: 白質層次，這可能要探討機轉了，頭會很痛。但我做過10/27 16:03
→ maurice9325: 好幾次確實是還了抗體後ko的細胞確實沒有表現蛋白。 10/27 16:03
→ maurice9325: *換10/27 16:04
→ blence: CRISPIR切完有很多狀況發生,驗一下WB真的比較保險10/27 20:04
→ blence: 比如說,切掉exon1,結果有exon1b,切掉ATG卻出現inframe ATG 10/27 20:04
→ blence: 或切中間後面exon,結果細胞用的是alternative exon10/27 20:05
→ blence: 只是有一定比例的抗體是用overexpressed lysate確認而已10/27 20:06
→ blence: endogenous看不到或錯認的情況必然會發生 10/27 20:06
→ blence: 不過找一隻可以用在適合需求如IP,IHC,Flow等,還是比有沒有 10/27 20:12
→ blence: KO/KD validation 來的重要10/27 20:12
→ blence: 我認為KO/KD最重要的賣點是買來堵住reviewer的嘴用10/27 20:17
確實CRISPR knockout就是希望能切到沒有protein表現呀。沒認到相對安心很多，不然做
起來心裡都卡卡的。
另我是學做抗體出身的，以前老闆都會掛在嘴邊，不要驗到overexpression的protein就
很爽，要再多方確認。因為對額外大量的外來蛋白產生抗體本來就是理所當然的會認到也
不奇怪，但是這些抗體能不能認到endogenous 才是最重要的。然後針對PTM的抗體，要確
認是不是“真的”又更難了。
※ 編輯: maurice9325 (101.12.46.124 臺灣), 10/28/2023 08:14:10
推 icome: Abcam, Genetex部分抗體有KO data11/02 12:04
→ icome: 沒看到你最後一句…目前大多是單株抗體廠商才會砸資源做KO 11/02 12:06
對呀，我目前只有看到這兩家，所以才會想問問還有沒有候選的，以及大家的意見。好希
望抗體商能跟專門KO賣細胞株或是siRNA的廠商有合作，我覺得對彼此的商品都有更進一
步的保障，增加消費者信心。
※ 編輯: maurice9325 (101.12.46.124 臺灣), 11/02/2023 15:42:46
→ blence: GTX之前有針對沒圖的品項給feedback就能自選一支當贈品 11/03 20:01
→ blence: KO/KD未嘗不可,也不用花大錢,但或許使用者不在意有無驗證 11/03 20:07
給換不囉嗦很好。但是更重要的是實驗時間呀。相對時間錢是小事了，但這就像一直在tr
oubleshooting，身心俱疲。
然後就是，我認為科學上應該要更務實，就像學到的應大膽假設小心求證，但是時間與KP
I帶來的壓力往往導致老闆們甚至自己不能把妥善求證做好，這樣很不好。
最後小抱怨一下，我的經驗gt牌與sc只能賣老鼠抗體牌，這兩家換抗體相對是乾脆的。某
CS大廠與MP大廠麻煩的要死，毛很多然後又很拖，時間耗更久。
※ 編輯: maurice9325 (49.216.28.158 臺灣), 11/04/2023 05:16:54
→ blence: 我指的不是換抗體,而是讓實驗室用KO/KD data換coupon或任 11/04 11:59
→ blence: 選等值抗體當回饋的方式,這無關無效抗體換貨的issue 11/04 12:01
瞭解，看懂了。我覺得這樣有互利的做法很好。我自己是很在意確認結果，畢竟怕給了錯
誤的資訊。
※ 編輯: maurice9325 (49.216.28.158 臺灣), 11/04/2023 13:31:45
推 cjsntu: Abclonal可以參考 11/09 00:49
推 apple23418: 推proteintech 12/08 13:41