→ CJfly:謝謝你^^我會把問題整理明確的真的很謝謝 推 210.85.229.65 03/30
※ 引述《CJfly (當吧...我無言了......)》之銘言：
: 非常抱歉唐突的跑來貴系打擾
: 實在是有問題想請問各位
: 想請問一下Nothern Blotting的實驗的幾個問題
: 很感謝您撥空回答:
: 1. 請問所使用的RNA是自行備製的嗎？
: 檢定RNA，除了吸光值260/280之外，有沒有使用到其他純度鑑定方法？
: (突然變成RNA的問題了，抱歉~~~因為跑出來吸光值不好
: 而且我這裡光譜儀很老舊，所以希望有更好的確定方法^^"")
基本上，我沒做過nothern bloting....
如果有說錯的話...就----幫我改正吧:P
RNA應該都是自己製備的...至於濃度，目前大家應該還是用260/280來測
如果說吸光值不好
機器太老舊不準或許有可能，可以問問看別間實驗室有沒有機器可以借用
但自己抽的不好也是有可能，如果說，這個步驟做不好的話...就很有可能會影響到
blotting的結果了
: 2. 很抱歉這個問題有些無聊，可是真的很想把實驗做好些...
: buffer究竟是用多好還是用少好呢？還有雜質、消毒等等工作
blotting所要用到的東西，應該都盡量保持乾淨...
buffer用多用少...其實我不太清楚你問的是什麼耶??
: 不知道貴系這邊都是怎麼做的呢？實驗都是完全照給的實驗步驟做的嗎？
: 如果用完全同樣的步驟在做，一個成功一個失敗，會做怎麼樣的檢討呢？
如果說，所有的東西都是用一樣的話，一個成功、一個失敗
就很有可能是人為操作的問題了....
: 討論都能討論出像怎麼樣的結果呢？還是就一直做到成功為止？
請那個做出來的人幫你看...看那些操作方法跟他不一樣
或看那個人做一遍看看...看那邊不同
或請他帶你做一遍...他怎麼做你就怎麼做
: 3. 常覺得自己這裡電泳跑的band怎麼看都看不出來，請問如果有貴系的學長姐有做過，
: 不知方不方便借看一下電泳比較漂亮的例子？或是可不可以指導一下究竟怎麼看band？
: 所使用的dye會影響嗎？
看不出來是看不到，還是不知道那一條是???
如果只看不到，可能是loading的DNA/RNA量太少或染色染的不夠久，基本上，和dye
沒什麼關係
如果是看不出來是那些....嗯....這個你們老師一定可以的:P
: 很抱歉問了很多奇怪又沒水準的問題
: 謝謝善心人士的回答
: 謝謝 感激不盡:)
不會..
ptt上還有biology版...或許你也可以去那邊問問看
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有時候，愛不愛一個人，放不放得下一個人
其實都需要一股莫大的勇氣！！
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