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這一題我找了許久 我只確定說測OD 590的值是要看細胞的生長情況 其實不一定要測590,很多protool是測600 但還沒找到為何要OD值達到某一範圍 我看到的protocol有說要0.4, 0.5等 OD值愈高是代表細菌含量愈高 我自己的看法是細菌的含量必須夠多,一來是這樣transformation成功 的細胞數目也會愈高,另外我覺得跟生長環境的壓力有關 這是我查到有關的一些資料: 質體DNA需藉由轉形作用(Transformation)的技術,將之引介入勝任細胞 (competent cell)及大腸桿菌體中,藉由寄主細菌的系統來達成複製DNA的目的。 進行細菌轉形作用最常用的一種方法是加入大量的氯化鈣(Calcium chloride), 導致大腸桿菌的細胞壁發生結構上的變化,變成勝任細胞,而有利於質體DNA進入細菌 細胞內。    大部分大腸桿菌品系的轉形效率在10*5~10*8之間,即每mg質體DNA中成功的 轉形細胞數目,影響此效率之因子與勝任細胞狀況或吸收DNA之能力有關。而這2項因子 又受是否用對數生長期之細菌,處理時是否將細胞保持在4 °C以下, 以及氯化鈣處理細胞的時間所影響。勝任細胞製備完成後,利用熱休克處理,使 細胞外鞘的油脂變性而刺激轉形作用,爾後給予一段時間恢復後,可用對抗生素之 抗性標記,進行篩選工作。 以上僅供參考啦,大家看看有沒有更好的答案 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.csie.ntu.edu.tw) ◆ From: 61.224.121.35