推 lakerjackt:你run的pcr長度有多長? 12/24 08:54
推 kkelvin:2%gel 會不會太濃了啊... 12/24 13:17
推 wulito:429 bp 12/24 23:28
※ 編輯: wulito 來自: 218.174.153.250 (12/24 23:31)
→ wulito:謝謝^^ 12/24 23:33
推 sidkawn:會不會是染劑壞了 或是濃度不對? 01/02 00:09
取菌液 1 c.c.
以 10000 xg 離心5分鐘
取沉澱 改加入 200ul 無菌水
煮沸 10mins 以 10000 xg 離心 5 mins
取上清液後
取 2ul 跑 PCR
PCR 添加的藥劑
template 2 ul
primer 各 1 ul
混合溶液 10 ul 內含
polymerase 1.25 U
MgCl2 1.75 mM
dNTP 200 uM
buffer <---- 這個產品上面沒有寫含量或濃度
無菌水 36 ul
之後以 95度 5 mins 1 cycle
95度 30 sec
55度 1 mins
72度 30 sec 35 cycle
72度 7 mins
4度 保存
最後以 2% agarose 跑電泳
20 ml 的膠 以 5ul 的 ETBr 內染
如果有需要增補的地方
請各位大大告知 謝謝^^
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