推 wulito:已經修正 謝謝你的提醒^^ 12/24 23:31
※ 引述《wulito (考完悶的緊)》之銘言：
: 取菌液 1 c.c.
: 以 10000 xg 離心5分鐘
: 取沉澱 改加入 200ul 無菌水
: 煮沸 10mins 以 10000 xg 離心 5 mins
: 取上清液後
: 取 2ul 跑 PCR
: PCR 添加的藥劑
: template 2 ul
: primer 各 1 ul
: 混合溶液 10 ul 內含
: polymerase 1.25 U
: MgCl2 1.75 mM
: dNTP 200 uM
: buffer <---- 這個產品上面沒有寫含量或濃度
: 無菌水 36 ul
: 之後以 95度 5 mins 1 cycle
: 95度 30 sec
: 55度 1 mins
: 72度 30 sec 35 cycle
你pcr的溫度環境是不是有漏寫..一般正常來說..在35cycle完以後
要再加個72度 x min..來方便做完未完全的pcr product長度..
最後才4度c
: 最後以 2% agarose 跑電泳
: 20 ml 的膠 以 5ul 的 ETBr 內染
: 如果有需要增補的地方
: 請各位大大告知 謝謝^^
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