推 a64toto:那請問應該如何題高呢? 04/30 00:12
推 microball:可能要調整 insert: vector比例 05/01 16:38
→ microball:還有兩者整體的濃度囉 05/01 16:38
※ 引述《a64toto (我)》之銘言：
: 之前在版上有看過一些相關的問題
: 可是還是有一些疑問想請教一下
: 我是使用Q牌的agarose gel extraction kit
: 在使用前與使用後都有跑agarose確認有band出來
: 可是在transform都沒有coloy長出來(接到pET 23a vector)
天阿 我跟你用同一個 vector 耶
而且我也還沒做出來XD
我覺得可能是要提高 ligation 的 efficiency 吧
因為有時候做出來也只是幾顆
如果效率再低一點可能真的就沒有 colony了
: 可是接到T vector的都有長出blue colony
: 所以應該不是transform出問題囉
: 那要check ligation有沒有問題的話
: 好像positive control是放已經切好的vector是嗎?這樣一定會長出colony嗎?
: 還是我搞錯啦
: 還有如果拿10 ul的ligation mixture(已經16度O/N)直接跑agarose gel
: 這樣能看得出來有沒有接起來嗎?
: 最後我染agarose gel的dye是SYBR不是EtBR,請問這樣會對ligation有影響嗎?
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天下最難的事，就是享受最簡單平凡的日子
而最簡單平凡的日子，往往是天下最單純的幸福
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