Re: [問題] 關於使用 phenol - chloroform 抽DNA的 …

[wulito (考完悶的緊)]

※ 引述《apa9394 (apa)》之銘言：
: ※ 引述《wulito (考完悶的緊)》之銘言：
: : 最近在嘗試這個方法 發現幾個問題想請問大家..
: : 1.使用phenol - chloroform 萃取時 中間有層乳白色層 應該是蛋白質吧
: :   應該要去掉 但發現不太好分離 往往都會被一起吸上來
: :   而且白色層非常的厚
: :   是因為proteinase K 反應不完全嗎
: proteinase K是作用在與DNA/RNA binding的protein上
: 白色層本來就是這樣你要吸慢一點...
: 拇指別放太快...

嗯嗯 謝謝唷^^

: : 2.最後在跑電泳與 260 / 280 確認的時候
: :   發現有兩條以上的亮帶 不曉得這樣算不算正常呢
: :   此外在測 260 / 280 時 居然沒有吸光值
: :   沒有吸光 又怎麼會有亮帶呢 好奇怪
: 兩條亮帶是18S/26S的rRNA
: 不是你要的東西吧
: 測亮帶的目的通常是要make sure DNA/RNA isolation的Quality

原來是這樣 感謝你^^

: 至於有無吸光...能再解釋清楚一點嗎
: 是260=0 280=0還是280>260?

兩個都是 = 0    @.@a
更正確的說 兩個測值都是負號
所以才覺得奇怪
明天打算再抽一次 確認結果

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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) 
◆ From: 140.120.200.44
推 apa9394:206/280的機器有先暖機10分鐘嗎?
→ apa9394:260