Re: 關於萃取plasmid DNA的問題

※ 引述《[e-mail] (shingo)》之銘言：
> ※ 引述《[e-mail] (想以玫瑰祭妳。)》之銘言：
> :   有點看不懂你表達的
> :   酒精Wash完後以TE溶掉DNA pellet,再沉澱DNA??
> :   是要re-salting out嗎?
> :   再說請楚點你的問題吧~ TE溶掉DNA後沒做特殊處理怎麼得到pellet..
> 加完TE後，還有加RNase A，然後再加1.6M NaCl放4度C讓它沉澱overnight，但隔天
> 再以top speed離心後，卻完全看不到pellet

  一般若是要再沉澱的原則是:
  5M NaCl加1/10體積
  再加2倍體積的絕對酒精

  我覺得你TE裡若只加鹽而不加酒精(或isopropanol),當然看不到pellet
  試試看吧,我是沒出問題過(前提是你的DNA不能少到看不到)

  記得加完酒精後,一定要搖均勻喔,不然-80也沉不出來
  另外,建議放到至少-20以下做沉澱動作~


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 ↑← Author: olin 從 211.76.173.108 發表