※ 引述《skank@kkcity.com.tw ( )》之銘言:
: ※ 引述《raiken.bbs@ptt.cc (raiken)》之銘言:
: > 如果只改變induction條件的話,一般就是測37度3小時或20度20小時
: > 再不然就是在放大完後,先冰一下做cold shake再去induction
: ^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^
: 這個方式還真的是第一次聽到耶..
: > 或許有機會可以改善
: 基本上會變成inclusion body主要的原因
: 好像是因為重組蛋白質可能對細菌本身有害
: 可以試著不要讓它表現量那麼高就有可能可以改善inclusion body的情形
: 試試看把inducer的量降低 或者培育的溫度降低
: 時間夠多的話就換一下vector
: pET system裡面有一些vector帶有signal peptide
: 可以把蛋白質分泌到paripalsmic space
: 這樣有機會可以解決inclusion body的問題
: 不過還是要看蛋白質啦 不見得每種蛋白質都可以分泌出去的
我做過 18度 25度 or 37度
只induce <1.5 hr
就不會變成inclusion body
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