Re: [問題]有關抽plasmid

[wangba (王八)]

※ 引述《Mouseking (叫我老鼠王....-_-)》之銘言：
: ※ 引述《wangba (王八)》之銘言：
: :   可以試試看在菌種養起來之後
: :   再加入少量的kanamycin (2~5mg/L)
: :   可以抑制細菌的生長
: :   但是並不會抑制plasmid的生成
: :   因此可以增加copy number
: 這招式真的嘛？可不可以提供學理文獻？真的沒聽過耶....


  我記錯了,不是kanamycin,而是chromphenicol

  這方法真的是可以用的,節錄原文如下:

Chloramphenicol amplification

The copy numbers of the current generation of plasmids are so high that

selective amplification in the presence of chloramphenicol is not necessary

to achieve high yields. However, when low-copy-number plasmids containing the

pMB1 or ColE1 origin of replication are prepared, the yield can be improved

by adding chloramphenicol (170 mg/liter) to amplify the copy number.

http://www1.qiagen.com/Plasmid/BacterialCultures.aspx?

: 是所有菌種都可以嘛？還是哪些特殊的菌種？
: 如果copy number低的菌種，我想到的笨方法是養個1000ml 在去抽plasmid DNA
: 不然就把原來的plasmid DNA再transformation到high copy number 的菌種不就好了？


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※ 編輯: wangba          來自: 140.112.129.9        (11/03 08:00)
→ jsi:我們家就是用這個! 滿好用的