看板 Biology 關於我們 聯絡資訊
※ 引述《ccjolin.bbs@bbs.badcow.com.tw (燃燒我的小宇宙)》之銘言: > 最近要試一種新的轉染細胞方法, > 我使用的是電穿孔(electroporation), > 但是做了幾次也查過相關資料, > 細胞不是死一堆就是DNA給我進不去, > 如果一直沒辦法的話, > 我可能還是會改成用Lipofectamine作實驗吧....= = > 我使用的是293T這株細胞, > 不曉得板上有沒有同學是在做這方面的? > 可以提供小弟一點建議, > 謝謝囉~ 293T?? 這是一株超級容易把DNA送進去的細胞 即便是用CaPO4都能達到至少在50-60%以上的transfection efficiency 為什麼還要用electroporation? 若是仍然要使用electroporation 建議可以試試用不同的細胞數跟DNA量 我是用hMSCs, 我是從50萬顆細胞到200萬顆 DNA量是從10ug到100 ug, 後來發現100萬顆細胞/50ug DNA是最好的condition 當然還要調electroporator current/duration 我不知道您的是哪一家廠牌的 不過一般說明書都會有建議用什麼樣的current/duration 試試看吧~~ -- ┌─────KKCITY─────┐ KKBOX 可立刻 聽音樂 ■ bbs.kkcity.com.tw ■■所有想找的歌通通不必等 ■■ └──From:158.130.148.25 ──┘ http://www.kkbox.com.tw --