Re: [問題] 請幫忙翻譯..

不用太氣餒 這樣的 material and method 就我看起來寫得實在很差 XD

另外對讀原文 paper 的一個建議是 未必需要先把文章 "翻譯" 然後在想辦法看懂

入門的方法 最好是先一句一句看懂以後 用中文的語法把原文的意思寫出來就好

另外 一些專門的名詞其實我是不建議刻意去翻成中文的

※ 引述《[e-mail] (1/2倒數)》之銘言：
> 瞬時轉染和雙螢光素?分析 (打不出來一直出現問號= =)
> Transient transfections and dual luciferase reporter assays
> T47D cells were subcultured with 0.56x10^5/well cells in 24-well plates 1 day
> before transfection.
> 這段是說T47D乳癌細胞株再轉染前先次培養在24well的plate 1天,每個well要有
> 0.5x10^5?
意思對了 不過我會把他寫得像中文一點，而且盡量把長句型拆開：

在 transfect 前一天

把 T47D 細胞

以每個 well 5.6x10^4（原文的表示法好怪）的密度

種到 24 well 的 plate 上

> Fugene 6 was used to transfect T47D cells with both
> 0.19 mg/well of a plasmid containing Firefly-LUC under the regulation of
> three copies of HRE from the PGK-1 gene (OB-HRE) and a minimal
> Simian virus 40 (SV40) promoter and 0.01 mg/well of pRL SV40 (which
> contains an SV40-driven Renilla LUC construct) as an internal control to
> normalise the Firefly-LUC expression according to the manufacturer’s
> instructions.
> 根據廠商的指示3個HRE的複製品:PGK-1 gene,最小的SV40啟動子和0.01mg/well的pRL SV4
> 當作實驗室內部control去 ????? Firefly-LUC的表現
> 以fugene6轉染T47D乳癌株細胞,plasmid嵌入Firefly-LUC
這句原文就很爛 拆開來比較好懂：

用 Fugene 6 這種藥劑來 transfect 前述的 T47D 細胞

每個 well 用了 0.19mg 的含有 Firefly-LUC 的 plasmid

        還用了 0.01mg 的 pRL SV40

前面說的那個含有 Firefly-LUC 的 plasmid, 其 Firefly-LUC 是被

  三份從 PGK-1 gene (OB-HRE) 而來的 HRE

  以及 SV40 promoter 的最小（有效）部分

所調控的

至於前面說的那個 pRL SV40

則又含有被 SV40 調控的 Renilla LUC

這個 pRL SV40 是作為 internal control

要 internal control 是為了要 normalize Firefly-LUC 的強度

上面所述都是乖乖按照原廠只指示

> Following 12 h transfection and 24 h serum starvation, cells
> were either incubated in the presence or absence of bFGF (10 ng/mL) for 6,
> 18, or 24 h under normoxic or hypoxic conditions, respectively, or
> pretreated with PD98059 (20 mM) or LY294002 (20 mM) for 20min before
> exposure to hypoxia in the presence or absence of bFGF (10 ng/mL) for
> 18 h.
> 接著12小時的轉染和24小時的serum starvation,在有氧或缺氧的情況下細胞培養，
> 存在或缺乏bFGF 6,18,24小時
> 在暴露在缺氧再存在或缺乏bFGF前以PD98059或LY294002前處理20分
在 12 小時的 transfection 以及 24 小時不給血清的培養條件以後

  在有氧或缺氧，存在或乏 bFGF 的情況下進行培養達 6,18,24 小時

或者是

  先以 PD98059 (20 mM) or LY294002 (20 mM) 處理二十分鐘以後

  才放到缺氧，存在或乏 bFGF 的情況下進行培養達 18 小時

> Whole cell lysates were collected and a luciferase assay was performed
> using the luciferase assay system from Promega following the manufacturer’s
> procedure. Results were quantified with a MicroBeta luminescence counter.
> 最後一段翻譯到氣餒了..........
> 對不起..我真的不行了 看不懂啦..以前沒學過過 也沒有跟實驗上網查知到了轉染是將DNA送進細胞的
> 方法但實在沒辦法將文章跟轉染連結在一起...請看的懂得人幫忙翻一下..感激不盡
收集 Whole cell lysates
（把整 well 的細胞打爛，所有東西都收集起來，詳情可以另查相關 protocol）

拿去作魔王路西法酵素分析（誤很大...）

這個路西法酵素分析系統是 Promega 這家公司的

流程都乖乖聽該公司的話

結果偷過 MicroBeta luminescence counter （儀器名）計量
--
And my soul from out that shadow that lies floating on the floor
  在那地板上浮動的影子中的我的靈魂

                Shall be lifted- nevermore!
                  將永不再起...
                                          --The Raven by E.A.Poe
--
※ Origin: 生命科學 BBS <bbs.life.nthu.edu.tw> 
◆ From: cpe-66-61-25-1.neo.res.rr.com
推 Mu6v2:謝謝!!^^