※ 引述《starch.bbs@bbs.ntou.edu.tw (缺氧轉錄子)》之銘言：
: ※ 引述《sancra.bbs@ptt.cc (新的開始)》之銘言：
: > 嗯，我有想過假設三個是同向的話
: > loxP ExoA loxP ExoB ExoC loxP ExoD
: 排列組合的意思就是您最上面所講的
: 隨機剔除任兩個loxP site 所包夾的區域
不是隨機的 loxP -Selection casette- loxP -Exon1 2 3- loxP
會先剪掉較小片段的區域 也就是selction casette的部份
這是運用時間差的方式來做conditional跟conventional KO
你在較短的時間內 拿到的clone會是只有剪掉selction casette的
較常的時間會拿到全部剪掉的
: 這也是早先做condition knockout所用的方法之一
: 將ES cell 送入此一剔除載體後
: 先經正負選以篩選出已發生重組的細胞
: 再送入Cre表現載體
: 讓它隨機剔除lox P site所包夾的區域
: 會這樣做是希望可以先剔除正選擇所用的抗生素基因
: 而暫時保留原本的基因片段(exon)
: 而不是直接剔除整段基因(因有些基因一旦失去可能就會造成胚胎死亡)
: 最後再與組織專一性表現的Cre交配
: 以得到在特定組織內剔除特定基因的老鼠
: 不過要拿到自己想要的clone機率有點低
: 要多挑幾顆才會拿到想要的
: 不過現在的做法已經可再搭配另一種剔除酵素及序列
: 不用再花時間去篩選
: starch
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如果孔子是那待沽的玉
我便是待斟的酒
用一生的時間 蘊釀自己的濃度
只為等待剎那的傾注
張曉風 釀酒的理由
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◆ From: 221.169.50.122