作者drave ((  ̄ c ̄)y▂ξ)
看板Biology
標題[問題] radioactive label
時間Wed Nov 4 21:01:10 2009
想問一下為什麼
若是對5'-end做放射性標定
可以利用alkaline phosphatase移除原有phosphate
然後再利用polynucleotide kinase加入radioisotope(phosphate)
而對3'-end則是需要利用end-filling方式來標定
因為3-OH無法被polynucleotide kinase磷酸化
5端可以被磷酸化 3端不可以
請問為什麼有這兩者差別呢@@?
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 114.33.55.37
推 vixen:除了酵素本身特性,請考慮PNK是否有3' phosphatase活性? 11/05 00:32
→ drave:嗯嗯thx~!!! 11/11 16:24