Re: [問題] ELISA coating確認

[snark (影燕)]

※ 引述《jonsauwi (JBY)》之銘言：
: 【問題】：
: 因為實驗的關係，我需要確認我的細菌全菌是否可以直接coating在ELISA plate上，
: 並能確定經過我們的實驗如wash、加藥劑等過程後，
: 都還能維持一定的數量吸附在plate上。
: （雖然查很多paper都顯示其實是可以coating的，但是要能用實驗證明）
: 【問題起因】：
: 實驗需要，如果不能coating我的實驗會變得很麻煩
: 【個人看法】：
: 目前想到的方法：
: 1.在細菌上做label（螢光或酵素）──老師說這太不直接、太複雜了
: 2.以番紅或亞甲藍染色後在顯微鏡下看──老師說太複雜且染劑裡的東西不確定是否會
:                                       影響到實驗
: 其實我認為做label是滿直接的方法了，
: 但或許是我自己想到死胡同裡去，
: （老師說他已有腹案，但就是不給我一點提示啊！Q_Q）
: 是否還有什麼更直接、更簡單的方法可以證明細菌有沒有吸附在plate上呢？
: 就算是一點點的提示也好！> <"
: 感謝！！
: 【參考資料/連結】：
: 無
不好意思
我不完了解你的實驗
不過我的實驗室是做biofilm的生成
所以我們都是用crystal violet  染 96 well plate 然後去測吸光值就可以了
給你參考看看
JOURNAL OF BACTERIOLOGY,
Jan. 2002, p. 290–301
Biofilm Formation and Dispersal under the Influence of the Global
Regulator CsrA of Escherichia coli

請看材料與方法中
Quantitative biofilm assay

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◆ From: 140.113.124.93
推 jonsauwi:感謝您，但是因為我的菌是Gram(-)的，所以才想說用番紅
→ jonsauwi:我想這邏輯是一樣的，那時提出來老師就一直說這方法太複
→ jonsauwi:雜，有更簡單的方法...Q_Q 我覺得這夠簡單了啊...
→ vixen:其實若先用酒精穿孔, CrystalViolet可染核,不分Gram+或-皆可
→ jonsauwi:這樣啊@@ 原來如此