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※ 引述《pinrupony (pinrupony)》之銘言: : 實驗室用的抗體是SANTA CRUZ的 : actin的比例是1:1000 : target的比例是1:200 : 目前使用的方式是一抗壓1小時,五分鐘洗三次 : 然後2抗壓1小時,五分鐘洗三次 : ECL的AB劑使用1:1的比例, : 之後用冷光儀拍照, : 這樣的方法,有時候band會很好看, : 但有時候band看不到,整張膜超白的, : 請問這樣是蛋白質的問題?還是抗體洗不乾淨? actin的壓法 若是santacruz的抗體 因為他濃度比較稀 所以1:5K-10K 一抗室溫反應10分鐘後 換成wash buffer 這樣不會過強 很漂亮 其他的protein 不一定,得看表現量 santazruz的抗體好得很好 糟的很糟 你得先確妳你買的那隻能用嗎? 是否有paper用過? -- 單身不代表寂寞,寂寞是走在一個不愛妳的人身邊的時候。 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.116.253.121
Ferry:actin當然要用millipore的 稀釋一萬倍都比s強 06/08 13:27