推 niolas:如果查molecular cloning有的話那寫的不錯 140.112.246.136 10/02
以下是實驗步驟 可以跟我解釋 為什麼嗎
越清楚越好 或是可以建議去哪裡查詢相關資料
能否寄到我的信箱 謝謝
DNA extracting
1.組織放於eppendorf中
2.加入500 SETbuffer ,50 proteinase K水浴55overnight
3.加入500 phenol , shake3min , 離心12000rpm 3 min
4.取上清液到新的eppendorf 中 , 加入500 phenol / chloroform (1:1) , shake 2 min , 離心12000 rpm 3 min
5. 取上清液到新的eppendorf 中 , 加入500 chloroform / isoamylalcohol (24:1) , shake 2 min , 離心12000 rpm 3 min
6.取上清液到新的eppendorf 中 , 加入50 (1 / 10V)sodium acetate及1000(2V)100%ethanol , 搖晃均勻
7. -20冰1hr
8. 離心12000 rpm 5 min ,移除ethanol
9.加入1c.c 70% ethanol清洗pellet 離心12000 rpm 1 min
10. 移除ethanol烘乾 ,加入TE buffer ,測吸光值
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