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想請問有挑過stable clone的板友 在 transfection 前 會先把plasmid linearize嗎?? 因為之前我們都有先經過linearize 用RE先切一刀(在不影響target gene以及相關functional gene 的位置)之後 再進行transfect 這樣挑到要的細胞的效率會差一點 但是會比較stable 不會只有以episome的狀態存在 (以上是我們一直以來的認知@@") 但是實驗室也有學姐的做法是不切的 好像也是可以 所以想問一下其他實驗室的狀況以及經驗~~ 感謝分享:) -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.129.74.200
blence:做repair實驗就會知道,就算切斷,也會有enzyme把它黏起來的 02/16 15:02
pacity:喔喔 原來.. 不過有看到一些挑stable clone的protocol 02/16 15:40
pacity:說要先linearize就是... 恩 先感謝分享:) 02/16 15:42