怎麼p就是p不出來

[tallballs (累的很充實)]

最近PCR做了不下10次
就是無法夾出自己所要的片段大小
primer也用軟體比對過了
還跟別人家的實驗室界template當positive control
annealing temp也只設56度而已  時間也延長
elongation的時間也延長了
就是夾不出來要的大小片段
要嘛就是比預期的大小小一低低
吼快煩死了
之前也沒這麼挫敗過
哪各高手能指點迷經一下
讓我頓悟吧

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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) 
◆ From: 61.230.223.229
推 SUESHIN:其實..那個annealing溫度可以在低一點點
推 oxoox:看看你的電泳圖下方有沒有dimer的產生 如果有請換一條
推 StillRick:biologi.uio.no/bot/ascomycetes/PCR.troubleshooting
→ StillRick:上面是網址，希望有幫助
推 reegqoo:annealing溫度做梯度測試最好條件 還有p出來的解序比對看
→ vixen:做過DMSO與MgCl2的titration嗎?