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※ 引述《Aqqqa (沒有暱稱)》之銘言: : ※ 引述《Ackbar ()》之銘言: : : 今天跟學長做實驗 : : 學長說plasmid DNA不可以vortex : : 會把plasmid弄斷 : : 想請問各位版友 : : plasmid不是circular form嗎 : : 怎麼會斷呢 : 這邊該想一個問題 : 抽取genomic DNA時會不會抽到plasmid? : 抽取plasmid DNA時, 那genomic DNA是在哪一步驟去掉的? 如果你是用加入solution I, II, III的方法,最後在solutionIII後, 會有混濁的渣渣和下面比較澄清的液體,離心之後,渣渣裡面包含菌體的殘骸及 genomic DNA,而澄清液裡面就含有你要的plasmid DNA (主要是利用Solution II裡面的強鹼將DNAdenature, 而Soluion III的醋酸將 DNA renature) : 總不能加DNase吧 : 抽取plasmid DNA時不能vortex主要是避免genomic DNA被弄斷 : 這樣會有小片段的形成, 就不能在之前的步驟和蛋白質一起被沉澱去除掉 : 至於plasmid DNA extraction技術再怎麼好 : 大多還是三種forms會出現 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 61.223.195.200