推 jbking:我想要問一下妳t-per/tissue weight大概是怎樣的呢 05/11 11:23
推 jedy:按照他附的protocol 20ml T-PER/1g tissue 05/11 12:30
※ 引述《tonyroro (孤獨存在)》之銘言：
: ※ 引述《jedy (想去南極跟企鵝玩!)》之銘言：
: : 最近在用這支抗體跑western (是跟cell signaling買的)
: : 使用的sample是小鼠的腦組織（cortex hippocampus amgdala)
: : 小鼠沒做任何實驗 就純粹當control
: : 可是我怎麼跑都沒有band出來
: : 每次看到一片空白的底片...就很無言
: : 但是我跑total CREB和actin都有band
: : 想跟這裡有跑這支抗體的人交流一下
: : 我這樣是有可能哪裡有問題嗎
: : 壓的時間不夠久? (我有壓過1個小時 還是沒band)
: : 先謝謝大家的建議囉
: 你跑的是看磷酸化的抗體
: 所以在lysis cell 抽protein時
: 那個lysis buffer可能成分必須要改一下
: 可能是這樣八
我用的是kit組
pierce出的halt protease inhibitor cocktail
halt phospphatase inhibitor cocktail
T-PER tissue protein extraction reagent
這樣有要改嗎??
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