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※ 引述《erised (除了我以外都很好)》之銘言: : ※ 引述《aggaci (有氣質的台客)》之銘言: : : 請問你(妳)們pre-binding時cold probe都是labeled probe的幾倍? : : 有無做過neagative control呢? : : 之前一直做不出來 火大了,pre-binding給他來個200倍 : : 結果是什麼都競爭掉了,連neagative control都競爭掉了(一定不會binding的那組) : 我試過10x和100x (molar ratio) : 100x的效果就比較好 : 可以看到specific band被compete掉 : 另外我也有同時和mutant site contained probe的competition比較 : 結果即使用100x那個specific band也不會被compete掉 : 不過我沒有用kit是用傳統的isotope label的 : hot probe量只是大概估計 不是很精準的量 : 但是我的cold probe (wt和mut) 量是加入一樣的 再請問您一下 請問您的mixture要loading時,有加dye嗎? 因為我不只在一個地方看到不加dye loading 於另一個well只加dye以便看跑到什麼地方... 為什麼呢? -- http://0rz.net/da0PG 我的相簿.... -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.114.100.165