[問題] 關於DNase 的問題

[Ottolee (笨 所以要努力)]

我們抽完RNA時候

要翻cDNA  要先把RNA  用DNase 處理

2ug 的RNA  加入1U的DNase

後來用3 或 4 ug的RNA  處理DNase

後來翻成cDNA  去跑 beta-actin  都沒有出來

聽有人說是因為  如果RNA 濃度太高  DNase 會連RNA 也吃掉

是這樣嗎?????

還有請問  有再抽RNA的大大們  你們是怎樣確定 你們抽的RNA  不包含DNA

你們是用其他啥方法來處理掉DNA的   麻煩你們提供一下寶貴的意見

感謝!!

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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) 
◆ From: 140.130.177.144
推 oxoox:你抽完RNA之後沒有跑電泳看看嗎?
推 mandible:其實我們LAB很少跑MOPSㄟ!還是看PCR產物就可以看的出RT是
→ mandible:是否成功.關鍵在於primer dimer是否有出現!
推 Ottolee: 對不起 我說錯了 是2ug RNA 加2U的DNase..
→ Ottolee:抽完RNA 有跑膠...
推 datro:可以請問一下 primer dimer有沒有出現是要怎麼判斷阿?
推 betrayme:DNase I 還是？
推 lpw4660:有人會做extraction把DNase去掉 確保之後做cDNA時不會被吃