protein無法induce

我使用pGEX-KG來產GST fusion protein

sequence出來的結果是正確的

但是在SDS-PAGE上沒有IPTG induction的痕跡

不死心的用western blotting check

可以偵測到GST和我的protein的signal

有沒有人知道為什麼

要怎麼解決?

拜託知道的人解答一下 感激不盡!!


--
 ◤◥ Origin:  中央生科˙生生不息  nculs.twbbs.org.tw 
 ◣◢ Author: chianny 從 210.241.43.125 發表
推 alaric:protein express濃度不夠吧. 可能要抓IPTG誘導最適條件.
推 longy:PAGE和western的靈敏度差很多吧!!
→ longy:你的蛋白質量應該非常少吧~~~
推 Orstor:可以用銀染試看看呀
推 aggaci:你做WB是用supernatant或是全細胞 cell lysate去做?
推 milkriver:western跑的出來銀染應該也沒問題 要在page上看到band
→ milkriver:可以試試看把medium拿去濃縮
→ ROKEE:銀染的威力大概在1-10ng，但western可以衝到1-10pg
推 aggaci:若要用銀染或western blot才看的到蛋白質，那有做的價值嗎?