作者skenny (Chord7#)
看板Biotech
標題Re: [問題] western中transfer的問題
時間Sun Aug 20 16:23:00 2006
※ 引述《CsmuKoji (hiphop MUSIC  )》之銘言：
: 最近western都做不太出來
: 自己查了很多protocol
: 發現很多protocol都說
: transfer buffer裡面要加SDS和methanol
我們家好像只有..20% methanol、10% 10x running buffer、70% ddH2O
SDS？ 應該不需要吧
: 請問它們的功用是什麼呢?
: 還有protocol中說要加攪拌子
: 可是我們lab好像都沒有耶
: 都是濕式然後整個拿到冰箱裡去transfer
: 請問有沒有加stir bar結果會差很多嗎?
: 先謝謝各位同學的幫忙了 ^_^
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◆ From: 203.71.94.30
推 blence:你忽略了running buffer裡頭組成的成分了 08/20 16:30
推 skenny:噢對後！ 08/20 21:06
推 CsmuKoji:那如果甲醇跟SDS沒加 會差很多嗎 08/20 23:30
推 cutebetty:差很多 沒有SDS transfer效率會很差 沒methanol的話 08/23 11:23
→ cutebetty:則是不容易將蛋白固定在膜上 大分子蛋白比較沒關係 08/23 11:23
→ cutebetty:小分子蛋白則影響很大 我的實驗經驗.....(忘了加的結果) 08/23 11:25
推 s73121:沒記錯的話若是小分子SDS最好不要加.SDS會幫助大分子bind在 08/25 09:27
→ s73121:membrane上..應該是這樣吧 08/25 09:28