推 aggaci:我覺的應該是你的insert影響到表現...如毒蛋白之類的 09/06 15:29
推 Monoson:先確定sequence有沒有inframe吧 09/07 01:30
大家好, 在這有問題想請教一下
我最近在做Transfection的實驗(Invitrogen 的 Lipofectamine2000)
我用的是pEGFP的Vector
我的insert是1.1kb, 約37kd的蛋白質
不過我結果出來, 只有Vector only的細胞有發亮
實驗組連個影子都沒有@@
有同學跟我說可能是Fusion protein影響到EGFP
所以我就先抽了cell lysate(Novagen 的 cytobuster)
想用Western壓壓看
另外有同學跟我建議說直接拿cell lysate去做excitation試試
看能不能測到EGFP的發光波長
這樣不知道可不可行
或是有沒有其他可行的方法呢?
感謝大家的建議 ^^
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