作者ssuny (Cheer up!!!)
看板Biotech
標題[問題]PCR批不出東西
時間Sat Sep 23 23:08:45 2006
身為一個研究生...有些實驗做不出來也是很合理的...冏
這陣子開始在clone一個gene
是以cDNA當作template去做PCR
一開始測condition時p了兩三次都有p到我要的片段
但是我開始要做clone時同樣的condition卻p不出來了...冏rz
annealing溫度降了10度多還是p不到band...不然就是band弱到幾乎沒有
目前已測試過cDNA,taq buffer, primer, dNTP, taq都沒問題..
這是卡到陰嗎...(／‵Д′)／~ ╧╧
有版友發生過類似的情形嗎?? 是如何解決的呢?
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還是連primer stock都壞了? 應該沒這麼衰吧....
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◆ From: 211.72.204.94
推 chiehgriffin:如何知道primer沒有問題？ 09/24 00:59
推 ssuny:我有重新從stock稀釋..跟之前曾p出來過的測試過 09/24 11:21
→ ssuny:而且primer stock是這一個月才定的...現在就壞有點離譜 09/24 11:22
推 llorraine:機器壞了？ 我有遇過這種的....orz 09/24 21:20
推 SUESHIN:有沒有想過水的問題.... 09/25 01:31
推 chory:建議 做nested試看看 09/27 20:24