推 transmore:理論上..%越高..應該可以把band壓的越緊密不是嗎? 09/27 21:41
※ 引述《[email protected] (jolly)》之銘言：
: 在下最近進行westerm的實驗
: 想要看的蛋白是cytochrome c (15kDA)
: 算是小分子的物質
: 因此就製作15% GEL進行實驗
: 可是最後壓片出來的Band很粗 不是細細的一條
: 而將同樣15%gel去看 actin(43kDA)結果的BAND 就是細的一條
: 撇除cytochrome c量表現很多 因為跑12.5% Gel時 band就不會很粗
: 請問各位也有這樣情況嗎 或是這是要怎麼解釋啊
: 感恩
這跟gel的%有關係 當跑15%的時候 小分子區域的位置就會被拉開
因此就會造成Band 很粗
而大分子區域沒辦法將距離拉這麼大
所以會被壓縮成一條細細的band
不過我比較想問W大 transfer的condition
因為我最近也要壓小分子蛋白 但是壓不出來
可以請問一下 transfer buffer的配方 跟transfer時的condition 嗎
謝謝^^
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