推 starcindy:我們是用50ug/ml for PC12(大鼠嗜鉻細胞) 09/28 10:44
請問有人用過Hygromycin B來選擇NIH 3T3或其他老鼠的細胞嗎?
這個抗生素對細胞的毒性好像比G418還要強很多
我在做transfection之前已經做了kill curve
用未transfect的細胞在12-well dish試了12個不同的hygromycin B濃度
找出能讓在五到七天內能讓>90%細胞死亡的最低濃度
大約是75 ug/mL
然後我將construct電衝進細胞,讓細胞在antibiotics-free medium養兩天後
開始selection,我也在大約在四到五天後看到massive cell death,
今天是第七天,我是有看到有活著的細胞,
但是size變小, 形狀看起來也不是很健康
我很擔心這些細胞到最後也會死掉,然後我什麼clone都挑不到
所以請有經驗的專家幫忙了,感激不盡
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