[問題] RT PCR的問題

[iris0542 (gg)]

   我現在在做RT PCR
   不管我怎麼試internal control跑PCR後
   就是不一樣多

   我絕得很奇怪  所以就拿了cDNA去測量
   發現量其實沒有差很多
   所以我又拿了cDNA含量較近的幾管去跑PCR
   結果GAPDH還是有的多 有的少 ~~

   還有有的基因根本就只有positive control做得出來
   其他的band都超弱


   想請問大家  我的問題出在哪裡?
   是機器的溫度不準嗎 ?
     還是cDNA丟太多?(我用3ug去翻cDNA  3ug去pcr)
   謝謝~~



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◆ From: 140.112.126.180
推 mandible:定量有問題吧!!