[問題] Western blot中標的蛋白位置老是不對.??

[ginmol (儲備博士)]

    很奇怪的現象，不知道版上各位先進是否有人分析過phospho-beta-catenin?

    我做完western之後發現，他的位置出現在60 KDa左右，

    但根據抗體的data sheet，應該是在92 KDa的位置....

    想請問大家是否有遇過類似情況？以及此現象可能是什麼原因造成的？


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◆ From: 140.116.48.158
推 aggaci:Santzcruz的抗體?
→ aggaci:打錯  是santacruz
推 ginmol:不是，是cell signaling
推 jbking:請問您的running buffer system為何
推 FromWood:這張膜有沒有試過其他的蛋白 例如actin等 位置正確嗎^^
→ FromWood:其實我覺得很多抗體都會認到很多non-specific的東西
→ FromWood:您可以想辦法看有沒有positive control做對照
→ FromWood:例如看看beta-catenin的位置 是不是也在同樣的地方
→ FromWood:才比較能確定你看到的band究竟是不是你要看的