推 silverberry:謝謝^^ 10/20 21:49
※ 引述《silverberry (告訴我...沒有的答案...)》之銘言：
: 前陣子我們實驗室和國外的實驗室取得合作的機會
: 這幾天終於收到對方寄給我們的"濾紙片"
: 歡天喜地的用 TE buffer 把 plasmid 回溶出來以後
: 備份到 DH5a 中後發現
: 我們實驗室沒有可以 overexpression 的那一株 E.coli BL21-AI
: 後來剛好有同學也是用這個 vector
: 可是因為他們實驗室也是跟別人拿 stock 的菌
: 所以他們的菌裡面已經有 vector 了 也不適合我們 transfomation
: 一般都是說如果在缺少抗生素 (select marker)的情況下
: 菌很容易會把 vector 丟出來
: 不過經過兩個禮拜的奮鬥 目前還是篩不出丟掉質體的 BL21-AI
: 不知道版上的各位有沒有人實驗室有在使用這一株菌
: 是否能分給我們
: 我查過廠商的網頁 關於這部份的菌株在無關商業利益時可以自由交換
: 所以不會觸法
: 或是有沒有前輩們可以指點我用什麼方法
: 能讓菌把 vector 吐出來
: 謝謝^^
實驗室中的學長是在broth當中添加Novobiocin這種藥物
最終濃度為32 micro g/ml
培養96小時候塗抹在plate上
重複幾次步驟後篩選出無質體的菌株
但是他是做乳酸菌的.....
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