Re: [求救] 請問 genomic DNA 的 PCR

[enisx (吱..吱吱..香蕉..吱)]

最近也做了較長片段的PCR (13 kb)

你抽取genomic DNA 的方法是哪種呢?

(我使用的是Mol. cloning內的方法)

Template的影響還蠻大的 (我用過老師丟給我的保存很久的genomic DNA

完全做不出來, 改用fresh extract的genomic DNA就成功了)

我用的是 Roche "Expanded Long Template PCR System"

(含兩種的polymerase mixture 及 buffer )  注意:primer及dNTP濃度

另外你可以參考一下這篇的作法及注意事項

http://europium.csc.mrc.ac.uk/WebPages/Database/Methods/longpcr.htm

加油~~~



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※ 編輯: enisx           來自: 140.112.5.61         (11/12 22:44)
推 ZecAhau:謝謝你  :D