發信人boblu.bbs@beta.life.nthu.edu.tw (六百),
看板Biotech
標 題Re: [問題] help 有關蛋白質純化
發信站清華生命科學 BBS (Sat Dec 9 21:17:24 2006)
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his-tag 的特性就是會 bind Ni (鎳)
NI-NTA 是帶有 Ni 的樹脂顆粒
把 cell lysate 跟 Ni charged resin incubate 一段時間
(或者是過 column)
his-tagged protein 會黏到上面
wash 以後再用 low pH buffer 來 elute 就可以得到純化的蛋白質
Urea 是用來 denature 蛋白質的
低 pH 值則可以干擾 his-tag 跟 Ni 的 binding
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莫非定律:
到了期末才會想起期初曾選了一門課卻一直沒去上
補充定律:
拿到成績單才發現上了一學期的課忘了去考期末考
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※ Origin: 生命科學 BBS <bbs.life.nthu.edu.tw>
◆ From: ppp-70-227-5-184.dsl.bcvloh.ameritech.net
推 mindy27:還有用較低的PH BUFFER 雖然ELUTE效果較好 12/09 22:17
→ mindy27:不過protein卻容易degraded,可以用較高pH buffer來平衡 12/09 22:18