[問題] 冷凍包埋

[circleming (新世紀音樂)]

最近要做冷凍切片，
但是我很豬頭，
將老鼠的spleen切下來後，
就很開心的加OCT用液態氮快速冷凍，
中間漏掉了一步：incubate with 20% sucrose 30min

查了網路資料，
說sucrose為冷凍保護劑...可以減少冰晶產生...
那這樣我現在漏掉了這一步～
但仍然是快速冷凍～
會影響組織的morphology很大嗎？

其實下禮拜應該就知道結果～
只是想說心裡先有個底，
出來的germinal center會長怎樣..> <
不知道各位能不能提供些意見...
謝謝

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◆ From: 128.255.122.184
※ 編輯: circleming      來自: 128.255.122.184      (12/16 04:22)
推 ostine:其實沒有sucrose，仍然可以做，morphology會比較醜一點是真
→ ostine:的，但是我們實驗室還是習慣直接丟OCT，因為切片的時候比較
→ ostine:切，經過處理再丟OCT的，都比較難切
→ ostine:不過不處理直接丟的時候，要小心保存，大概從-80拿出來個
→ ostine:3次，那塊tissue就差不多不行了，切出來的片子很容易破掉
推 circleming:謝謝，我就是注意到切片的時候容易破，才想到..
→ circleming:原來漏掉了這一步...-_-"