Re: [求救] 抽pasmid的量都好少

[aggaci (學鋼琴，左手怎麼那麼笨)]

※ 引述《puec ()》之銘言：
: 請問你是transform什麼樣子的plasmid進去E.coli。有時候E.coli遇到不喜歡的
: plasmid產量就會很少，就算是你增加體積，抽出來足夠的plasmid以後，用enzyme
: 切過就會出現smear!!我猜你的plasmid可能很大，所以一看到smear你就以為是genomic
: DNA 污染。smear產生的原因是因為kit抽出來的dna不夠純，帶了一些dnase。為什麼？
: 因為E.coli不喜歡嘛。
: 建議你可以去別人家借借看其他牌子的kit抽抽看，我猜結果應該是一樣。在我手上

  我不這麼覺得...
  我們lab用這組maxi kit通通都說很難用
  換invitrogen的kit，結果量都超高....maxi可以抽到2mg(1ug/1ul)的plasmid
  換clonetech的Maxi，結果也一樣
  不過這組quality差一點，260/280 Ration 1.7左右

  我個人真的覺的是這組kit的問題
  前面不也有人說過有雷同的情形嗎
  或是有誰用這組kit抽成功過的

  所以換組kit吧  或是跟promega反應

: 的plasmid都是超不穩定的，就算是用qiagen抽，一切，還是會有smear。但是我發
: 現MN (前clontech)的nucleobond抽出來的plasmid相當乾淨，並不會有上述問題。
: 如果你的plasmid真的很大的話，記得用高溫(60度左右)的熱水去elute，可以提高
: 產量。

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◆ From: 140.114.100.165
推 HerrHans:大家都有用 都說不好用..如果都是最近買的話....
→ HerrHans:搞不好是Promega最近這批貨有問題喔...
→ aggaci:我們  2年前買的、做的
推 kitiara:我用Promega抽了上百次Plasmid  覺得又快又好用耶
→ kitiara:Ratio都是1.8以上  不過我們實驗室是一次買很多箱
→ kitiara:不知道是不是最近的有問題
→ kitiara:忘了說我是抽Maxi