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板上前輩們好: 最近因為要同時進行6個基因的mRNA定量 使用real-time PCR, 雖然做相對定量 但仍使用細胞株A562的cDNA做為standard 想請問有standard的情形下, 是否reference gene (GAPDH)與target gene可以在不同run進行? 並且每個target gene都可以用同一盤GAPDH的結果去normalize? 另外,如果target gene為low copy number 是不是可以先行跑5個循環左右 再把這些PCR product做real-time PCR 如果我的概念有問題,還請前輩們指正. 感激不盡 ^^ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 163.29.223.22 ※ 編輯: hychou 來自: 163.29.223.22 (12/25 10:45)
qqo8855436:target 跟 internal可以在不同run跑 12/29 22:22
qqo8855436:我的經驗....low copy不至於會[偵測不到 所以不需先跑 12/29 22:23
qqo8855436:要用同一管的cDNA去跑TARGET跟internal (以上參考) 12/29 22:24