推 mandible:DMSO我也加了!!謝謝~~ 12/28 22:05
推 mandible:我查過了..我的Sense Tm值61度.antisense59度c 12/28 22:08
※ 引述《mandible》之銘言：
: PCR很多次了
: 還是P不出來
: 感覺primer dimer很明顯?
: 請問高手有哪些方法?可以教導我!!
: 我的條件是
: 94度C-1mins
: 45度C-2mins
: 72度C-3mins
: 跑36 cycles
: pcr product大概是784bp(我知道很短)但是就是跑不出來!
: 用的是taq proofreading enzyme (因為要送去定序)
: 大概是這樣!x
94度 30s
60度 30s
72度 1min
若GC content > 50% 要加betaine or DMSO
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.114.100.165