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如果你的template是 cDNA,那你可能是碰到了一些secondary structure, secondary structure可能在你的primer 黏上去以前就形成了,因此佔據了 你的primer原本應該結合的位置。 解決方法很簡單,primer做長一點,往3'延伸就可以了。我的經驗是... 36個mer 的primer做不出來,加到40個mer就ok了。 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 220.130.218.41
mandible:是指forward單一的嗎??還是forward+reverse總共40mer? 12/30 23:02
puec:單一一邊就有40mer 01/01 21:11