推 rebirth:柏油也有養p19耶~ 02/07 18:39
推 rebirth:同柏油所說 養在10cmm T75 T25都可以 換算一下細胞數 02/07 18:44
推 boyo:我沒養P19 不過有做過RA induction 02/07 18:59
※ 引述《auigoji0720 (auigoji0720)》之銘言：
: 上次的那位高手^^
: 我想請問幾個問題?
: 上次你有跟我說加RA之後的第四天要將細胞dilute後再種回dish,
: 妳是用trypsin將細胞分離,
: 我想問你是怎麼用的,
: 因為細胞是懸浮的狀態收下後裡面含有medium,要如何使用trypsin呢?
suspension cell要換medium或者要將agrregation打散
先用離心機離(大概1000rpm 5~10分鐘)
離完後將medium輕輕倒掉(不要連細胞一起倒了)
吸PBS再洗細胞 洗個兩三次medium乾淨了再加trypsin(打散aggregation)
最後就是換medium跟算cell density
: 另外,細胞一定要養在36mm的dish上嗎?
: 因為我必須要養一定的量再收細胞run western,所以必須養在10cm dish
: 你種回dish的濃度是依照dish大小分的嗎?
: 這些是我遇到的問題,謝謝你的幫忙!!^^
這是最先實驗設計時就要想好 你induction都做完了才發現細胞數量不夠會來不及
看你要做什麼實驗要用多少細胞量 就用什麼dish
每一種dish可以養的細胞量都不太一樣
一般說來 36mm的petri dish 可以養大概2x10^6
10cm大概是(1~1.2)x10^7左右
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如果孔子是那待沽的玉
我便是待斟的酒
用一生的時間 蘊釀自己的濃度
只為等待剎那的傾注
張曉風 釀酒的理由
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◆ From: 221.169.50.122
※ 編輯: boyo 來自: 221.169.50.122 (02/07 18:36)