[問題] 請問加上His tag DNA sequence 的方法

[suncloth (春風面紙染秋意)]

因為想在病毒的其中一個蛋白質n端加上his tag方便偵測,
要讓病毒在感染複製時都跟著表現,
所以沒法使用表達his tag的載體.

想請問一下大家,
可以直接在primer上加上ATGCAUCAUCAUCAUCAUCAUATG....  總共約30~35mer的primer
                         ^^^^^^^^^^^^^^^^^^*******
                         六個HIS的code     病毒蛋白質code

然後做pcr再置換入病毒基因嗎?

另外我注意到更小的tag 是poly-arg,
但是好像比較少人用,
antibody 也是his tag的較多,
有其他更小的tag嗎?
大家有什麼看法呢?
請多多指教,

謝謝回答.
大感謝.

--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) 
◆ From: 140.123.86.66
推 aggaci:可以
推 freshing:可以 +1
推 jazzdevil:用過幾次 都用外加histag的方式
→ jazzdevil:不過你可以參考commercial的vector來設計..有些不會用
→ jazzdevil:連六個一樣的codon,會在第二四六的第三鹼基上換wobble
→ jazzdevil:base, 畢竟一段sequence裡面有太多重覆的 總覺得不大好
推 suncloth:嗯嗯,謝謝各位熱心的回答.要趕快來試試.