作者fungihsu (Work hard/Play hard)
看板Biotech
標題Re: [方法] 請問strategene的mutagenesis kit幾個問題
時間Thu Mar 8 08:12:33 2007
※ 引述《ameilover (思考該走的方向)》之銘言:
: 最近要做mutagenesis了
: 但是看他裡面附的protocol有些問題
: 1. 關於Dpn1: protocol說要把Dpn1從mineral oil底下吸起來(我看完的理解是這樣)
: 要用"pointed pipet tip" 請問那個東西一定要用嗎? 可以跟誰買呢
Mineral oil是早期的PCR機器沒有加熱蓋的時候,為了避免液體蒸發才需要用的。
現在的PCR反應應該都不需要加了。
: 2. NZ amine:我找了很多間公司,還沒看到一個完全符合名字的產品
: 有很多名字很像的,但是又不曉得到底差在哪裡,哪間公司的好用也不知道
: 請問有哪間公司可以直接買到NZY+ broth? 拜託大家跟我推薦一家吧
通常這個我就用LB medium。
: 3.tetracycline: protocol說那個competent cell是抗tetracycline的
: 所以就不能選擇有同樣抗藥性的plasimd 是為了避免沒有selection的效果嗎?
如果competent cell本身就有tetracyclin-resistance,用也是tetracyclin-resistance
plasmids做 transformation 的時候,無論cell本身有沒有這個plasmid,都會有抗藥性,
這樣無法區分帶有plasmid的clones。
: 我是實驗室第一個做這個實驗的人
: 附近的實驗室也沒有人在做@@
: 請有經驗的版友們可以跟我分享一下操作上的經驗嗎?
: 謝謝
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◆ From: 130.126.51.136
推 longy:沒錯~所以一般clone vector都是抗AP,勝任細胞則抗其他抗生素 03/08 16:45
推 gjir:也可用SOC替代 03/10 21:49