第一次在這裡發問
如果不妥之處 請多指教
我最近在找一段基因的sequence
一開始先用其他物種相同基因conserved domain的sequence設計出degerate primer
用這個degenerate primer可以夾出一段跟conserved domain相似的片段
之後再利用這個片段的序列來設計iPCR的primer往外擴增
我一開始是用RT的方式得到cDNA
為了要把cDNA的頭尾相接成一個circular form的plasmid
就用restriction enzyme digestion cDNA
再把頭尾ligation起來
因為cDNA是single strand 所以是不是要先合成double strand的cDNA之後
再用restriction enzyme來進行digestion
那double strand的cDNA要怎麼合成呢？
是用random primer進行一般的PCR嗎？
Thanks!
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◆ From: 140.115.48.89
※ 編輯: Porkcan 來自: 140.115.48.89 (03/11 23:35)
※ 編輯: Porkcan 來自: 140.115.48.89 (03/11 23:45)