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關於萃取DNA時 如果最後沒將酒精完全揮發 pellet沒有完全乾燥就回溶 會影響PCR的結果嗎 因為老闆給我的Protocol是讓pellet自然晾乾(室溫20min) 但每次幾乎都沒乾過 = =||| 然後電泳看DNA quality 都出現一陀的亮帶兼smear...(不sharp) PCR的結果也就時好時壞(同樣條件去跑) 請問各位高手 這個步驟出差錯會產生什麼結果 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 125.226.53.216
lakerjackt:其實沒有很乾沒關西,對PCR來講是看你的DNA純度,酒精有댠 04/02 19:58
lakerjackt:餘一點點,其實影響不太! 04/02 19:59
lakerjackt:若你認為你的DNA不夠純的話,你可以把回溶的DNA在98度C 04/02 20:06
lakerjackt:加熱3 min,在離13200rpm約5~10 min,然後把上清液吸上來 04/02 20:07
lakerjackt:丟掉沉澱物,上清液就再當你的DNA吧 04/02 20:08
forWinds:老闆是跟我說過可能會跑不出來...你先跑跑看吧^^ 04/02 23:22
forWinds:我曾經幹過同樣的事...不應該說我根本忘記烘乾...那次確뤠 04/02 23:22
forWinds:實也P的不好...但是也只是推測...因為我用的primer也還在 04/02 23:23
forWinds:測試...並不專一 04/02 23:25
xenopus:QIAGEN.... 04/03 09:53
xenopus:sorry 我是回下一篇 04/03 09:53
monchi:我是放入烘箱15MIN 或是空管離心13000rpm3min 04/04 19:13
monchi:pcr的產物有可能會亂亂的。不然就把denature 的時間加長看갠 04/04 19:19