推 phoneta:非常感激你呢 謝謝^^ 04/15 13:40
※ 引述《phoneta (蜂起)》之銘言：
: 我買了要拿來測 ROS的 c400
: 但他完全沒給說明書 不知道要從何下手
: 有沒有好心人 實驗室有用過這各東西的 可以給予指導?
: 我的實驗大概是 將細胞種在10cm 0r 6cm dish 加藥後
: 要看時間點0 .3 . 6 .9 .12. 24 hr ROS產生的量
: 會用flow cytometry的方法測量 不是用顯微鏡看
: 我不知道要在何時加入C400 希望有用過的人教一下 很急 謝謝^^
我實驗室使用的是C369及C6827
基本上也是測ROS的
所以我想應該是都一樣
在做完時間點後要做flow之前才加的
(通常就是往前推時間,要加染劑之前幾小時加藥,把所有時間點都做在一起
這樣要染也比較方便)
我用的細胞是會貼的
所以我是先加染劑於37度反應三十分後
在吸掉染劑,加入trypsin讓細胞掉下來
用medium收集細胞後離心
加入buffer放冰上然後就去上機了
另外~~要避光喔
至於染劑的濃度的話~~就會因為各種細胞不同了
還有就是一般是用DMSO或100%ethanol溶染劑(先配成stock)
因為這兩種都會對細胞有影響~~所以最後加入的量最好在1%以下
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