→ stemcell:沒聽過 fix 再用detergent處理過後的細胞 還是活的... 05/05 10:55
→ stemcell:你要不要先去了解其他人live cell image怎麼做的 05/05 10:56
推 stemcell:一般都是注射或是使細胞表現有螢光tag的蛋白 05/05 10:58
各位先進好
小妹最近開始想做confocal
得到的資訊大多是fix細胞的步驟
可是我想要做那種看到protein internalization然後被derade掉的
所以要做活細胞影像
不過有幾個問題 想問一下有做過的人
我的細胞是suspension cell
我想看的是cKit (RTK) mutant 他會自動林酸化然後turn over
加藥物之後 cKit會不穩定然後 cKit expression就消失了(on western)
想請問一下 1. 活細胞影像的fix 還有打洞 使用的Material ??
如果是fix的細胞 是4% paraformadehye + 0.5% Triton X100
活細胞要用啥ㄌㄟ ?? 又不會弄死細胞又可以intracellular stain的
2. 如果我有抗體bind cKit -->會不會影響他internalization??
我不清楚我的抗體會部會block cKit function yet...
先這樣..感恩....請各位先進給點意見
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