最近正在做表現蛋白質的實驗
利用pET30a接入欲表現的蛋白質(約30 KD)後
送入BL21(DE3)中 加入IPTG以誘導表現出蛋白
目前誘導表現情形很順利 28度C 6小時
在破菌前有取 200 ul 確認過有誘導出來
但問題是每次在破菌後 我要表現的蛋白質會減少很多
不知道是什麼問題?
希望各位前輩能提供一些建議 感激不盡～
破菌的方法：
Sonication 強度為３或４都用過 打十秒 停十秒 共１０分鐘
French press 使用大 Cell
但都依樣結果
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