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我最近想利用western blot 的方法 將一個大約55kd的蛋白質分離 就是將他的phosphorylated form 和non-phosphorylated form分開 磷酸化的位置為serine 112 請問一下要如何分離呢?? 我目前是用8x10的 BioRad 的跑膠儀器 是否該用更大的跑膠儀器 還是要用幾%的gel去跑呢 因為55kd要大不大..要小不小的.. = = 而且我參考的PAPER 可以有明顯的分離.. 他們也是用western 的方法 請各位高手指點一下小弟 謝~~ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.112.212.241
saviora:可以用2D試試 05/14 19:24
liuse:2D 1D不太可能 05/15 02:21
Lipaty:樓上難道沒看過磷酸化的band會稍微高一點嗎? 05/18 11:22
machin:推樓上,除此之外 我記得不同大小有不同濃度的PAGE適合跑 05/19 19:36
shern:先用phospho-ser的抗體做IP,再做Western 05/23 22:46